Fish yönteminde nelere dikkat edilmelidir?

Fish yönteminde nelere dikkat edilmelidir?

Fish yönteminde kullanılan probların işaretlenmesi önemli bir aşamadır. Bu işaretleme doğrudan floresan işaret taşıyan probun hedef DNA ile hibridizasyonu ile olabildiği gibi indirekt işaretleme ile yani floresan sinyal güçlendirilerekte yapılabilir. Genellikle indirekt yöntem tercih edilir.

İndirekt işaretlemede Biotin gibi moleküller önce prob DNA içerisine yerleştirilir sonra biotinle çok sıkı bağ yapan avidin gibi moleküller ortama konur avidin molekülleri ayrıca floresan madde taşırlar(Florescein izotiyosiyanat FITC=yeşil renk). Daha sonra ortama anti avidin antikorları konur, bu antikor hem probdaki avidin hemde ortamdaki avidinlere bağlanır böylece sinyal güçlenir.

Leave a Reply

Your email address will not be published. Required fields are marked *



VEYA



Not: Şifreniz otomatik olarak eposta adresinize iletilecektir.

Şifrenizi mi unuttunuz?

Eposta adresinizi size yeni bir şifre göndermemiz için girmelisiniz.